產(chǎn)品簡(jiǎn)介
SuperPure Taq DNA Polymerase是從克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá),經(jīng)特殊分離純化工藝制備的。具有高純度、高活性、高穩(wěn)定性的特點(diǎn),無(wú)核酸酶殘留。其分子量為94 kDa。SuperPure Taq DNA Polymerase具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切酶活性,無(wú)3’-5’外切酶活性。在PCR反應(yīng)中,SuperPure Taq DNA Polymerase延伸速度為1-2 kb/min,產(chǎn)物3’端帶A,可直接用于T/A載體克隆。
活性定義
1單位(U) SuperPure Taq DNA Polymerase活力定義為在74℃、30 min內(nèi),以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。
質(zhì)量控制
SDS-PAGE檢測(cè)純度大于99%;經(jīng)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶活性。能有效擴(kuò)增人類基因組單拷貝基因;室溫存放一周,無(wú)明顯活性改變。
酶貯存緩沖液
20 mM Tris-HCl (pH8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; Stabilizers; 50% Glycerol。
10×Taq Buffer
200 mM Tris-HCl (pH8.4); 200 mM KCl; 100 mM (NH4)2SO4; 5 mM MgCl2; 它成分。
·10×Taq Buffer分為含Mg2+和不含Mg2+兩種,可自選。
·不含Mg2+的Buffer,另外配有25 mM MgCl2。
·如果沒(méi)有特別指定,通常提供的為含有Mg2+的Buffer。
適用范圍
一般用于DNA片段的PCR擴(kuò)增、DNA標(biāo)記、引物延伸、序列測(cè)定、平末端加A等,產(chǎn)物可以直接用于T/A載體克隆。
工業(yè)客戶實(shí)驗(yàn)例
使用SuperPure Taq DNA Polymerase檢測(cè)HBV,標(biāo)準(zhǔn)曲線從3×107 IU/ml 以3倍稀釋7個(gè)梯度,低濃度模板 (A) 為300 IU/ml,取200 μl不同濃度樣本使用TIANGEN病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒 (DP315) 提取,100 μl溶解HBV核酸,取5 μl用進(jìn)行檢測(cè);結(jié)果顯示與競(jìng)爭(zhēng)廠家相比,超純Taq有穩(wěn)定的擴(kuò)增效率,對(duì)低濃度模板(可低至50 IU)有高的靈敏度和高熒光值。