產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品采用了獨(dú)特的雙組分熱啟動DNA 聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過在PCR 反應(yīng)液中加入熒光探針,然后檢測反應(yīng)進(jìn)程中的熒光強(qiáng)度,達(dá)到檢測PCR 產(chǎn)物擴(kuò)增量的目的。
1. 本產(chǎn)品中雙熱啟動酶構(gòu)成了獨(dú)特的酶活自動調(diào)節(jié)系統(tǒng)。酶活自動調(diào)節(jié)系統(tǒng)是由化學(xué)修飾的HotStar Taq DNA 聚合酶和抗體修飾的Anti Taq DNA 聚合酶組成,使SuperRealPreMix 在整個(gè)PCR 反應(yīng)過程始終保持最佳的DNA 聚合酶活力,配合精心優(yōu)化Buffer 體系,從而具有定量準(zhǔn)確,擴(kuò)增效率高,重復(fù)性好和寬廣的可信范圍的特點(diǎn)。
2. 本產(chǎn)品經(jīng)過優(yōu)化特別有利于Taq 酶發(fā)揮其5’-3’外切酶活性,使熒光信號的釋放達(dá)到最佳的效果。此外,SuperRealPreMix(Probe) 也充分降解了探針熒光淬滅基團(tuán)的信號釋放,經(jīng)過上述優(yōu)化, 用相同量的模板將得到更強(qiáng)的信號。
試劑盒特點(diǎn)
■ 雙核優(yōu)勢:雙酶熱啟動系統(tǒng),穩(wěn)定性強(qiáng),數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確。
■ 線性檢測范圍寬:可至少達(dá)107 的線性檢測范圍。
■ 靈敏度高:可檢測病毒,微生物等低豐度模板。
■ 擴(kuò)增能力強(qiáng):熒光信號更強(qiáng)。
儲存條件
收到本產(chǎn)品后, 請立即置于-20℃保存。從-20℃取出使用時(shí), 將凍存的2×SuperReal PreMix(Probe)和50×ROX Reference Dye融解,然后輕輕顛倒混勻,待溶液完全均一后再行使用。如解凍后沒有使用,須徹底混勻后重新冷凍。(在解凍過程中鹽會出現(xiàn)分層現(xiàn)象,未混勻進(jìn)行冷凍,鹽晶體的析出將會對酶造成損害)。如需一段時(shí)間內(nèi)經(jīng)常取用,可在2-8℃條件下儲存3個(gè)月。避免反復(fù)多次凍融。
注意事項(xiàng)
■ PCR 反應(yīng)的預(yù)變性條件必須設(shè)定為95 ℃ 15min,用以激活熱啟動酶。
■ 如果試劑沒有混勻,其反應(yīng)性能會有所下降。使用時(shí)請上下顛倒輕輕混勻,請不要使用振蕩器進(jìn)行混勻,盡量避免出現(xiàn)泡沫,并經(jīng)瞬時(shí)離心后使用。
■ 引物終濃度為300 nM,探針終濃度為200 nM 可以在大多數(shù)體系中獲得良好的擴(kuò)增結(jié)果。
■ 需要進(jìn)一步優(yōu)化引物濃度的,可以在50-900 nM范圍內(nèi)調(diào)整;需要進(jìn)一步優(yōu)化探針濃度的,可以在100-500 nM 范圍內(nèi)調(diào)整。
■ 20 μl 反應(yīng)體系中,基因組DNA 或cDNA 模板的使用量一般小于100 ng,逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板時(shí),使用量應(yīng)不超過PCR 體系終體積的20%。